TP de biologie 1 - 4PMBTP19

Objectif(s)

Les travaux pratiques de biologie moléculaire permettent d'illustrer les connaissances théoriques sur les molécules du vivant par des expériences pratiques. Ils forment aux techniques de bases du génie génétique et de la biochimie des protéines.

Contenu(s)

Les TP se déroulent en 5 sessions dans lesquels seront analysé le gène codant pour une protéine ainsi que la protéine elle-même. Nous aborderons en particulier

• Dans la partie ADN
  
  • la purification d'un ADN plasmidique par lyse alcaline
  • le dosage de l'ADN
  • l'amplification gène-spécifique par PCR
  • l'analyse par enzyme de restriction

• Dans la partie protéine
  
  • expression d'une protéine recombinate dans E coli
  • purification par chromatographie d'affinité
  • quantification protéique (Bradford)
  • analyse SDS PAGE et Western blot
  • quantification par ELISA