Travaux pratiques : Molecular biology & Biochemistry

 

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Domaines : biologie moléculaire

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Objectifs pédagogiques

Les travaux pratiques de biologie moléculaire permettent d'illustrer les connaissances théoriques sur les molécules du vivant par des expériences pratiques. Ils forment aux techniques de bases du génie génétique et de la biochimie des protéines.

 

Déroulé du TP / contenu

Les TP se déroulent en 3 sessions dans lesquelles seront analysé le gène codant pour une protéine ainsi que la protéine elle-même. Nous aborderons en particulier

Dans la partie ADN

• la purification d'un ADN plasmidique par lyse alcaline
• le dosage de l'ADN
• l'amplification gène-spécifique par PCR
• l'analyse par enzyme de restriction

Dans la partie protéine

• expression d'une protéine recombinate dans E coli
• purification par chromatographie d'affinité
• quantification protéique (Bradford)
• analyse SDS PAGE et Western blot
• quantification par ELISA

 

• Marianne Weidenhaupt